Elektroforez, moleküllerin boyutlarına ve elektrik yüklerine göre ayrılması amacıyla yapılan bir laboratuvar tekniğidir, böylece hastalıkların teşhisi yapılabilir, protein ekspresyonu doğrulanabilir veya mikroorganizmalar tanımlanabilir.
Elektroforez, laboratuvar rutininde ve araştırma projelerinde kullanılan basit ve düşük maliyetli bir prosedürdür. Elektroforezin amacına göre, örneğin bir tanıya ulaşmak için diğer testlerin ve muayenelerin yapılması gerekebilir.
Ne için
Elektroforez, basit ve düşük maliyetli bir teknik olduğu için hem araştırma projelerinde hem de tanıda çeşitli amaçlar için yapılabilir. Böylece, elektroforez aşağıdakilere yapılabilir:
- Virüsleri, mantarları, bakterileri ve parazitleri tanımlayın, en yaygın araştırma projelerinde bu uygulamadır; Babalık testi; Proteinlerin ekspresyonunu kontrol edin; Mutasyonları tanımlayın, örneğin lösemi tanısında yararlı olun; Dolaşımdaki hemoglobin türlerini analiz edin orak hücre anemisi tanısında yararlı; Kanda bulunan protein miktarını değerlendirin.
Elektroforezin amacına göre, doktorun teşhisi tamamlaması için diğer tamamlayıcı testlerin yapılması gerekebilir.
Nasıl yapılır
Elektroforezi yapmak için, transillüminatör olarak da bilinen UV veya LED ışık ekipmanına ek olarak, amaca, elektroforez tamponuna ve kazanına, moleküler ağırlık markerine ve bir flüoresan boyaya ek olarak poliakrilamid veya agaroz olabilen jel gereklidir.
Jeli hazırladıktan sonra, kuyucuklar, popüler olarak tarak olarak adlandırılan ve jelin yerleşmesine izin verecek şekilde jelde belirli bir nesne yerleştirilmelidir. Jel hazır olduğunda, maddeleri kuyulara uygulayın. Bunun için, gözlerden birine bir moleküler ağırlık markörü, ne olduğu bilinen bir pozitif kontrol, reaksiyonun geçerliliğini garanti eden bir negatif kontrol ve analiz edilecek numuneler yerleştirilmelidir. Tüm numuneler bir floresan boya ile karıştırılmalıdır, çünkü bu şekilde transillüminatör üzerindeki bantları görselleştirmek mümkündür.
Örnekleri içeren jel, spesifik tampon çözeltisini içeren elektroforez kabına yerleştirilmelidir ve daha sonra cihaz, elektrik akımı ve sonuç olarak ayırma için önemli olan potansiyel fark olacak şekilde açılır. parçacıklar yük ve boyutlarına göre. Elektroforetik çalışma süresi prosedürün amacına göre değişir ve 1 saate kadar sürebilir.
Belirlenen süreden sonra, transforüminatörden elektroforetik çalışmanın sonucunu görmek mümkündür. Jel UV veya LED ışığı altına yerleştirildiğinde, bant desenini görselleştirmek mümkündür: molekül büyüdükçe, göçü küçülür, kuyuya yaklaşır, molekül ne kadar hafif olursa, göç potansiyeli de o kadar büyük olur.
Reaksiyonun doğrulanması için, pozitif kontrolün bantları görselleştirilmeli ve negatif kontrolde hiçbir şey görselleştirilmemelidir, aksi takdirde kontaminasyonun bir göstergesidir ve tüm süreç tekrarlanmalıdır.
Elektroforez türleri
Elektroforez farklı amaçlar için gerçekleştirilebilir ve amacına göre, en yaygın poliakrilamid ve agaroz olan çeşitli jel türleri kullanılabilir.
Mikroorganizmaları tanımlamak için elektroforez araştırma laboratuvarlarında yapılması daha yaygındır, ancak teşhis amaçlı olarak elektroforez, ana elektroforez türleri olan protein miktarındaki artışla birlikte gelişen hematolojik hastalıkları ve gelişen hastalıkları tanımlamak için kullanılabilir.:
1. Hemoglobin elektroforezi
Hemoglobin elektroforezi, kanda dolaşan farklı hemoglobin tiplerini tanımlamak için yapılan ve hemoglobin senteziyle ilişkili hastalıkların varlığını tanımlamayı mümkün kılan bir laboratuvar tekniğidir. Hemoglobin tipi, anormal hemoglobin varlığının tanımlanmasına izin veren, normal patern ile karşılaştırılabilen doğrulanmış bir bant paterni ile spesifik bir pH'ta, ideal olarak 8.0 ve 9.0 arasında elektroforez yoluyla tanımlanır.
Ne için yapılır: Hemoglobin elektroforezi, olasemi anemisi ve hemoglobin C hastalığı gibi hemoglobin sentezi ile ilgili hastalıkları araştırmak ve teşhis etmek için ek olarak talasemiyi ayırmada faydalıdır. Hemoglobin elektroforezini nasıl yorumlayacağınızı öğrenin.
2. Protein elektroforezi
Protein elektroforezi, kanda dolaşan protein miktarını değerlendirmek ve böylece hastalıkları tanımlamak için doktor tarafından talep edilen bir muayenedir. Bu test, kanın, diğer maddeler arasında proteinlerden oluşan plazmayı elde etmek için santrifüj edilen bir kan örneğinden yapılır.
Elektroforezden sonra, bir bant paterni görüntülenebilir ve daha sonra teşhis için temel olan proteinlerin her bir fraksiyonunun miktarının belirtildiği bir grafik görüntülenebilir.
Ne için yapılır: Protein elektroforezi, doktorun çoklu miyelom, dehidratasyon, siroz, inflamasyon, karaciğer hastalığı, pankreatit, lupus ve hipertansiyonun oluşumunu, bant raporuna ve muayene raporunda sunulan grafiğe göre araştırmasını sağlar..
Nasıl yapıldığını ve protein elektroforezinin sonucunu nasıl anlayacağınızı anlayın.
